Page 14 - Dr. Öğr. Üyesi - İmmünohistokimya Yöntemi TIP 1

İmmünohistokimya Basamakları

• Doku Kesitleri

✓Antkor-antijen bağlanmasını görünür

• Antijen retrieval hale getirmek için çeşitli belirleme

• Endojen enzimlerin bloklanması yöntemleri kullanılır.

• Bloklama işlemi ✓Kromojenik belirleme: antikora bağlı

olan enzim substratı ile reaksiyona

• Primer antikor inkübasyonu

girerek proteinin bulunduğu yerde

• Sekonder antikor inkübasyonu renk açığa çıkarır (enzimler;

peroksidaz, alkalin fosfataz).

• Kromojen-substrat kompleksi

✓Floresan belirleme: antikora bağlı

• Zıt boyama

olan florofor, floresan mikroskop ile

• Kapama işlemi görünür (fluorescein, rhodamine)

• Mikroskopik inceleme